免疫膠體金技術(shù)的基本知識(shí)接下來(lái)膠體金廠家來(lái)為大家介紹一下免疫膠體金技術(shù)的基本知識(shí): 一、免疫膠體金技術(shù)基本知識(shí) 1、膠體金這個(gè)概念 氯金酸(HAuCl4)在氧化劑影響下,可匯聚成一定大小的小金顆粒,產(chǎn)生帶負(fù)電荷的疏水膠水溶液。因?yàn)殪o電引力成為相對(duì)穩(wěn)定的膠體狀態(tài),故名膠體金。 2、免疫金標(biāo)記技術(shù) 膠體金顆粒物表面負(fù)電與蛋白質(zhì)的正電官能團(tuán)因靜電力而產(chǎn)生堅(jiān)固融合。膠體金對(duì)蛋白質(zhì)有極強(qiáng)的吸附功能,蛋白質(zhì)等高分子材料被吸附到膠體金顆粒物表面,無(wú)化學(xué)鍵產(chǎn)生,標(biāo)識(shí)后大分子蛋白質(zhì)活力不發(fā)生變化。 3、膠體金的示蹤劑原理 金顆粒具有較高的電荷密度的特點(diǎn)。金標(biāo)蛋白質(zhì)在相應(yīng)的配位處大量聚集時(shí),在顯微鏡下由此可見(jiàn)深褐色顆?;蚩捎^測(cè)紅色或淡粉色色斑。 免疫黃金白銀上色:運(yùn)用金顆??纱呋磻?yīng)納米銀轉(zhuǎn)變成金屬銀這一原理,根據(jù)銀顆粒堆積,在電鏡下由此可見(jiàn)抗原抗體反應(yīng)的呈陽(yáng)性位置展現(xiàn)銀的深褐色。 二、膠體金制取需要注意的事項(xiàng) (1)玻璃器皿清潔:玻璃器皿應(yīng)肯定清理,用前酸洗鈍化、鋁硅酸鹽。 (2)實(shí)驗(yàn)試劑、水體:試驗(yàn)自來(lái)水一般用雙蒸水。緩沖溶液有足夠的緩沖容量,濃度值不可太高以防金膠體溶液自凝。 三、免疫膠體金的制取 1、制取膠體金標(biāo)識(shí)蛋白質(zhì)應(yīng)注意的問(wèn)題 (1)蛋白質(zhì)的預(yù)備處理。蛋白質(zhì)先要對(duì)低電離度水分析,清除酸鹽成份。用微孔濾膜或超速離心去掉蛋白質(zhì)溶液中的細(xì)微顆粒。 (2)低含鹽量的緩沖溶液。過(guò)多鹽可讓金顆粒產(chǎn)生凝結(jié)。 (3)PH接近蛋白質(zhì)等電點(diǎn)或略偏堿性。蛋白質(zhì)所在融解情況比較適合偶聯(lián)反應(yīng),蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)在金顆粒表面的吸附容量較大。 (4)蛋白質(zhì)最可用量挑選:可以使膠體金相對(duì)穩(wěn)定的適宜蛋白量加上10%即是最好標(biāo)識(shí)蛋白量。 (5)膠體金與蛋白質(zhì)偶聯(lián)反應(yīng)后,添加增稠劑,以避免發(fā)生凝結(jié)。一般選用PEG和牛血清白蛋白作增稠劑。 以上就是膠體金廠家為大家介紹的文章,希望能夠幫助到大家! |